肝癌细胞对树突状细胞线粒体功能的抑制作用

目的探索肝癌细胞（hepatocellularcarcinomacells,HCCs）分泌的可溶性细胞因子营造的微环境对树突状细胞（dendriticcells，DCs）线粒体功能状态的影响，以进一步理解肿瘤的免疫逃逸机制。方法用免疫磁珠从人外周血分离CD14＋单核细胞，加入粒-巨噬细胞集落刺激因子（recombinanthumangranulocyte-macrophageCSF,rhGM-CSF）、白介素4（IL-4）将单核细胞诱导分化为未成熟DCs（immatureDCs，imDCs），利用肿瘤坏死因子α（recombinanthumantumornecrosisfactor-α,rhTNF-α）将imDCs诱导为成熟DCs（matureDCs,mDCs），分别将imDCs和mDCs与肝癌细胞在Transwell中共培养48h，正常培养和撤生长因子培养的DCs作为对照，利用免疫荧光和MTT比色法研究HCCs对DCs的线粒体膜电位、酶活力和胞内钙离子浓度的影响。结果与HCCs共培养后，流式细胞仪的检测结果显示：imDCs和mDCs的线粒体膜电位分别从（659.991±17.052）和（473.741±11.676）下降到（482.681±7.935）和（407.189±5.051）（P<0.05），imDCs和mDCs胞内钙离子浓度分别从（427.983±3.358）和（232.587±3.815）增加到（517.308±0.249）和（413.062±2.981）（P<0.05,P<0.01），MTT比色法的检测结果显示imDCs和mDCs的酶活力分别从（0.764±0.089）和（0.708±0.019）下降到（0.291±0.019）和（0.218±0.019）（P<0.01）。结论HCCs可能通过抑制DCs的线粒体功能来损伤其免疫功能。？