缺氧条件下大鼠神经元白细胞介素-1受体相关激酶-1的表达变化

目的　观察大鼠神经元B35细胞株中白细胞介素-1受体相关激酶-1（interleukin-1receptor-associatedkinases-1，IRAK-1）mRNA及蛋白在缺氧后表达量的变化，并探讨其变化与神经元中TNF-α表达的关系。　方法　将培养的B35细胞置于低氧（3%O2、5%CO2、92%N2）条件下培养1、3、6、12、24、48、72h，应用RT-PCR方法检测IRAK-1mRNA表达的变化；Westernblot检测IRAK-1蛋白含量的变化；激光扫描共聚焦观察IRAK-1在细胞内的分布及含量变化；酶联免疫吸附法检测培养液上清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量，并与IRAK-1蛋白进行相关分析。　结果　B35细胞IRAK-1mRNA表达与正常对照相比，1h开始增加[（0.786±0.042），P<0.05]，3h增加明显[（0.947±0.055），P<0.05]，6h达到高峰（1.245±0.077），P<0.05]，12h仍维持在较高水平[（0.911±0.041），P<0.05]，24h降至正常水平以下但无明显差异[（0.596±0.047），P>0.05]，48h以后进一步减少[（0.520±0.049），P<0.05]。IRAK-1蛋白表达变化也呈类似趋势。相关性分析结果显示，培养上清液中TNF-α含量的变化与IRAK-1蛋白表达变化呈正相关（r=0.88，P<0.05）。　结论　神经元内存在TLR/IL-1R家族信号转导系统的关键因子IRAK-1，缺氧损伤可诱导其表达，与TNF-α的表达相关。