神经干细胞与血管内皮祖细胞共移植促进移入缺血再灌注模型大鼠脑内神经干细胞向神经元分化和突触的形成

目的研究神经干细胞与血管内皮祖细胞构建的复合移植体对移植入缺血再灌注模型大鼠缺血半暗区的神经干细胞向神经元分化及突触形成的影响。方法300只SD大鼠根据完全随机原则分为假手术组、缺血对照组、缺血神经干细胞移植组、缺血血管内皮祖细胞移植组和缺血共移植复合体移植组。分离培养新生大鼠海马神经干细胞和外周血管内皮祖细胞，利用神经干细胞和血管内皮祖细胞及层粘连蛋白共建共移植复合体；将神经干细胞、血管内皮祖细胞及共移植复合体分别移入缺血再灌注模型大鼠缺血半暗区，在1、3、7、14、30、60d，利用免疫荧光双标观察神经干细胞向神经元分化情况；免疫组化观察突触素P38在缺血半暗区的表达，RT-PCR检测突触蛋白-Ⅰ和连接蛋白43mRNA在缺血半暗区表达，Westernblot法分析突触小泡蛋白在缺血半暗区表达。结果与缺血神经干细胞移植组相比，缺血共移植复合体移植组除1d外，其余各时间点Brdu-神经元特异性烯醇化酶双阳性细胞数增加（P<0.05,P<0.01）；突触蛋白-Ⅰ和连接蛋白43mRNA表达增加（P<0.05,P<0.01）；突触蛋白-Ⅰ蛋白表达增加（P<0.01,P<0.05）；除1、3d外，其余各时间点突触素P38免疫阳性反应产物吸光度值增大（P<0.05,P<0.01）。结论神经干细胞和血管内皮祖细胞共移植，可促进移入大鼠缺血半暗区神经干细胞向神经元分化，并促进其突触形成和神经网络的重建。