鼠早产和低氧浓度对胆红素神经毒性的增强作用

目的探讨早产、氧浓度异常对胆红素的神经细胞毒性的影响及其可能的发生机制。方法7d龄新生足月和早产大鼠各36只，完全随机分为常氧+生理盐水组、常氧+胆红素组、低氧+生理盐水组、低氧＋胆红素组、高氧+生理盐水组、高氧＋胆红素组。常氧+生理盐水组，经小脑延髓池注射0.02ml生理盐水；常氧+胆红素组，经小脑延髓池注射胆红素20μg/g；低氧+生理盐水组，在氧浓度8%的密闭箱中暴露3h，经小脑延髓池注射0.02ml生理盐水；高氧+生理盐水组，在氧浓度95%的密闭箱中暴露3h，经小脑延髓池注射0.02ml生理盐水；低氧＋胆红素组，氧浓度8%的密闭箱中暴露3h后经小脑延髓池注射胆红素20μg/g；高氧＋胆红素组，氧浓度95%的密闭箱中暴露3h后经小脑延髓池注射胆红素20μg/g。各组均于24h断头取脑。HE染色及TUNEL显示海马神经细胞凋亡，免疫组织化学染色法检测iNOS和TNF-α表达。结果①注射胆红素的大鼠均出现俯伏、转圈、四肢颤动、翻滚、活动减少等异常神经行为，早产组最明显。②HE染色观察胆红素+低氧组海马神经细胞坏死、凋亡最明显。③TUNEL显示，早产胆红素组海马神经细胞凋亡数（30.17±3.76）较足月组（23.33±4.89）明显升高（P<0.05）；足月和早产低氧+胆红素组的海马神经细胞凋亡率[分别为(27.67±3.01)和(34.33±3.01)]较胆红素组[分别为(23.33±4.89)和(30.17±3.76)]明显升高（P<0.05），而高氧+胆红素组海马神经细胞凋亡率与胆红素组相似。④早产胆红素组海马神经细胞TNF-α释放（0.425±0.014）较足月组（0.388±0.020）显著增多（P<0.05），两组iNOS表达水平相似；低氧+胆红素组海马神经细胞TNF-α和iNOS表达[(0.437±0.024)和(0.440±0.001)]较胆红素组[(0.253±0.010)和(0.388±0.020)]显著增加（P<0.05）；高氧+胆红素组海马神经细胞TNF-α释放（0.416±0.011）显著增多（P<0.05），iNOS表达无明显升高。结论胆红素可诱导TNF-α等炎症因子释放增多；低氧、早产增加TNF-α和/或iNOS等炎症因子的释放和表达，增强胆红素的神经毒性。减少围产期窒息、早产，控制炎症因子释放，对防治胆红素脑病有重要意义。