Herpesvirusentrymediator/CD160介导人调节性T细胞对CD4+效应性T细胞的抑制作用

目的研究HVEM、CD160在不同CD4+T细胞亚群，不同功能状态下的表达以及HVEM-CD160通路对CD4+CD25+调节性T细胞（regulatoryTcell，Treg）免疫调节作用的影响。方法采用流式细胞分析术分别检测3例不同个体CD4+CD25+Tregs及CD4+CD25-T细胞在1000IU/ml人重组IL-2、与细胞数量1∶1的抗CD3/CD28mAb包被磁珠的刺激下第0、3、5天HVEM或CD160的表达情况。采用1.25、2.5、5μg/mlHSV1gD蛋白处理4例不同个体Treg，培养5d后，将处理的Treg与Teff在体外以1∶1混合并加入300IU/mlIL-2及等量抗CD3/CD28mAb包被磁珠，行混合淋巴细胞共培养，于培养结束前18h加入3H-TdR，共培养7d后检测各组细胞CPM增殖情况。5μg/mlgD蛋白处理5例不同个体Treg后将其细胞浓度调整为5×106并接种于6孔培养板内，加入500IU/mlIL-2共培养7d，行RT-PCR(RealtimePCR)分析TregFoxp3基因表达。结果HVEM在初始CD4+CD25+Tregs表面呈中度表达，平均表达率为42%，且随着Treg的活化其表达HVEM上调；CD160在初始CD4+CD25-T细胞表面呈低度表达，平均表达率仅7%，但伴随其活化，表达CD160有所上调。采用不同浓度HSV1gD蛋白处理Treg后2.5μg/ml与5μg/ml浓度组抑制CD4+CD25-T细胞增殖作用与空白对照组（276±35）相比明显下降，CPM值分别为(2014±202)、(6535±531)，差异具有统计学意义（P<0.05），且具有浓度依赖性；RT-PCR分析发现Treg经5μg/mlgD蛋白处理后Foxp3基因表达率下降，仅为空白对照组的48%，差异具有统计学意义（P<0.01）。结论机体接受免疫刺激后Treg通过上调HVEM表达与CD4+CD25-效应性T细胞（effectiveTcell，Teff）表面上调表达的受体CD160交联从而上调TregFoxp3基因的表达，最终介导了Treg对Teff活化、增殖的抑制作用，HVEM-CD160通路对Treg免疫调节作用具有重要意义。