BMP-13在C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用

目的研究骨形态形成蛋白-13（bonemorphogeneticproteins-13,BMP-13）促骨髓间充质干细胞C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的作用。方法骨髓间充质干细胞C3H10T1/2经pAdEasy-BMP-13重组腺病毒质粒感染后，利用Westernblot以及免疫荧光技术于1、2、3周时分别检测C3H10T1/2干细胞心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达变化；同时以实时荧光定量PCR技术进行心肌分化特异性基因GATA4、MEF2C的检测，4周后应用电子显微镜观察干细胞超微结构变化。结果C3H10T1/2干细胞经pAdEasy-BMP-13感染诱导后，细胞开始伸展，折光性增强，细胞间连接较紧密且细胞排列趋向一致；pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞于3周时，Westernblot技术检测出心肌特异性肌钙蛋白（cardiacisoformoftropninT,cTnT）、连接蛋白Cx43(connexin43,Cx43)（P<0.05），免疫荧光检测有蛋白α-MHC、α-actin表达，而于1周和2周时未检测出。同时pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞1、2周和3周均未发现有心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达。3周对各组均出现心脏早期发育特异性基因GATA4、MEF2C的表达，但pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞表达量明显高于pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞（P<0.05）；pAdEasy-BMP-13感染后细胞于4周时透射电镜下观察出现闰盘及肌丝样细胞超微结构，而pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞没有出现类似结构。结论pAdEasy-BMP-13可以诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化。