肝素酶特异性细胞毒T淋巴细胞表位多抗原肽负载的树突状细胞疫苗体外抗肿瘤免疫效应研究

目的研究肝素酶（heparanase，Hpa）细胞毒T淋巴细胞（cytotoxicTlymphocyte，CTL）表位多抗原肽（multipleantigenpeptides，MAP）疫苗能否诱导更强的Hpa特异性CTL反应。方法HLA-A2.1限制性肝素酶CTL表位多抗原肽负载正常人外周血来源（peripheralbloodmononuclearcell，PBMC）树突状细胞（dendriticcell，DC），诱导CTL，采用4h标准51Cr释放实验检测上述CTL对不同肿瘤细胞的免疫杀伤效应；采用ELISPOT实验检测效应细胞分泌IFN-γ的能力。结果肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的CTL对Hpa阳性且HLA-A2.1匹配的KATO-Ⅲ胃癌细胞、U2OS骨肉瘤细胞、SW480结肠癌细胞具有杀伤效应，且其杀伤效应强于相应的单肽，在最大效应细胞/靶细胞(effector/target,E/T)时高出率均大于16%；其对HLA-A2.1阴性的HepG2肝癌细胞和Hpa阴性的MCF-7乳腺癌细胞不具有杀伤效应，但是对MCF-7/Hpa乳腺癌细胞和HepG2/HLA-A2肝癌细胞具有杀伤效应，且其杀伤效应强于相应的单肽，在最大E/T时高出率均大于18%；其对自体淋巴细胞和DC不具有杀伤效应。另一方面人肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的IFN-γ分泌水平强于相应的单肽。结论肝素酶CTL表位MAP疫苗能激发较相应单肽更强的特异性和非特异性抗肿瘤效应。