HHIP基因启动子区甲基化在食管癌细胞系中的研究

目的探索人食管癌细胞系Hedgehog信号通路相关基因的表达状况、HHIP基因启动子区甲基化状态与HHIP表达的关系。方法采用RT-PCR方法检测5个食管癌细胞系Hedgehog信号通路SHH、PTCH1、SMO、HHIP和Gli的表达情况。用基于甲基化敏感酶和甲基化依赖酶酶切、并结合荧光定量PCR方法分析食管癌细胞系HHIP基因启动子区甲基化状态，并检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后食管癌细胞系HHIPmRNA表达的变化。结果SHH、PTCH1、SMO和GlimRNA在5个食管癌细胞系中都有较高表达。HHIP在Kyse450细胞系的表达较高，约为其余4个细胞系表达量的3~5倍。与之相应，Kyse450细胞HHIP基因CpG岛为非甲基化状态，其余4个细胞系CpG岛都发生了高甲基化。采用5-Aza-CdR去除甲基化后，HHIP基因表达较处理前增加了10~20倍。结论Hedgehog信号通路的异常激活可能参与了食管癌的发生、发展过程，食管癌细胞系HHIP基因的表达抑制与其基因启动子区CpG岛高甲基化相关。