RNA干扰沉默STIM1表达对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的应用RNA干扰抑制肺动脉平滑肌细胞(pulmonaryareterysmoothmusclecells，PASMCs)基质交感分子1(stromalinteractionmolecule1，STIM1)基因表达，探讨STIM1表达抑制后对PASMCs缺氧增殖反应的影响。方法采用离体培养大鼠肺动脉平滑肌细胞，设对照组、阴性siRNA组（SiNT）及阳性siRNA组（SiSTIM1），低氧（3%O2）培养24h，Westernblot法检测PASMCs中STIM1基因表达变化，MTT比色法及[3H]-TdR掺入法检测PASMCs的增殖情况，流式细胞仪检测PASMCs的细胞周期变化。结果Westernblot检测SiSTIM1组STIM1蛋白相对灰度值为(0.355±0.008)，显著低于对照组(0.624±0.017)和SiNT组(0.618±0.021)(P<0.05)。MTT比色实验及[3H]-TdR掺入实验显示低氧培养24h后，对照组和SiNT组PASMCs较常氧组增殖显著(P<0.05)，而SiSTIM1组PASMCs增殖活性较对照组和SiNT组显著降低(P<0.05)。流式细胞仪检测结果表明低氧培养24h后，对照组和SiNT组PASMCsG0/G1期细胞比例较常氧组显著降低(P<0.05)，而SiSTIM1组G0/G1期细胞比例则显著高于对照组和SiNT组(P<0.05)。结论RNA干扰介导STIM1基因沉默可明显抑制低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。