人原代表皮干细胞及其传代细胞生物学特性的比较

目的比较体外培养条件下人原代表皮干细胞与传代细胞的生物学差异。方法选择2009年5-12月在我科医学美容门诊行包皮环切术后的包皮标本共20例，从包皮标本获得人原代表皮干细胞，利用0.25%胰蛋白酶冷消化4h获得传代细胞，利用CASY?系统计数后计算细胞的黏附率，倒置相差显微镜下观察原代干细胞及传代细胞的形态学变化，观察干细胞表面标志物整合素β1、CK19，细胞分化的表面标志物CK10的表达，以及各代细胞基因组的表达差异。结果原代干细胞的黏附率为（55.44±2.42）%，随着传代次数的增加，2代、4代及6代细胞的黏附率分别为（44.30±2.76）%、（30.95±2.24）%、（20.64±1.37）%，与原代细胞相比，差异有统计学意义（P<0.05）。细胞生长融合时间随着传代次数而增加。各代细胞均表达整合素β1；原代、2代及4代细胞表达CK19，但6代细胞不表达CK19；部分6代细胞表达CK10。原代及4代细胞基因组比较结果相近，但与6代细胞结果差异较大。结论与原代干细胞相比，体外培养的人表皮干细胞在4代以后生物学特性发生改变，体外实验宜选用4代以前的细胞。