早期类风湿关节炎患者肠道微生物群落的分析

目的研究类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)患者肠道微生物群落分布特点，探讨类风湿关节炎与肠道菌群的关系。方法收集30例早期RA患者(RA组)与21例健康受试者（对照组）粪便样本，培养与测定肠道菌群计数水平；提取粪便样本基因组DNA，PCR扩增细菌V6-V8区16SrDNA，产物经变性梯度凝胶电泳分离，获得肠道菌群DGGE图谱，分析肠道细菌丰富度、Shannon-Wiener指数、均匀度指标，用非加权类平均法对图像进行相似性聚类分析，并绘出聚类树形图，研究RA患者肠道菌群结构与健康受试者的差异。结果双歧杆菌含量：RA组为(6.21±1.48)CFU/ml，显著低于对照组(8.55±0.90)CFU/ml（P<0.01），脆弱类杆菌的含量：RA组为(6.54±1.28)CFU/ml，显著低于对照组(8.73±0.90)CFU/ml（P<0.01），乳杆菌、梭菌、肠杆菌、肠球菌数量差异无统计学意义（P>0.05）。肠道菌群DGGE图谱示：与对照组[丰富度：(22.8±3.12)；Shannon-Wiener指数：(2.98±0.26)；均匀度：(0.96±0.05)]相比，RA组丰富度[(16.0±1.05)，P<0.01]、Shannon-Wiener指数[(2.48±0.14)，P<0.01]和均匀度[(0.90±0.05)，P<0.01]显著降低，分别表明RA患者肠道细菌的种类（丰富度）、菌群结构复杂程度、细菌的相对密度（均匀度）显著降低，在DGGE图谱下方区域RA患者肠道菌群条带数量减少，消失明显。图谱相似性聚类分析显示：20例样本聚为两类，一类样本中包含10例患者与1例健康人，二类样本中包含9例健康人。表明RA患者肠道菌群有较高的相似性，RA与健康人肠道菌群相似性低。结论早期RA患者肠道存在菌群失调，肠道细菌数量及结构与健康人有显著差异，其差异变化可能是类风湿关节炎的发病因素之一。