Sphk1基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响

目的通过抑制鞘氨醇激酶-1（sphingosinekinase-1，Sphk1）基因表达，观察其对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响。方法使用脂质体2000将化学合成的靶向Sphk1基因的小干扰RNA（smallinterferingRNA，siRNA）转入人乳腺癌MCF-7细胞。使用流式细胞术（FCM）检测转染效率，荧光定量RT-PCR（qRT-PCR）和Westernblot法检测Sphk1的mRNA和蛋白表达水平。利用CCK-8法检测细胞的增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell小室法检测细胞迁移能力。结果Sphk1siRNA转染效率达89%。转染siRNA后，MCF-7细胞的Sphk1mRNA和蛋白表达水平均明显下降，以siRNA-2效果最为显著（P<0.01）。转染Sphk1siRNA-2后，MCF-7细胞的增殖和迁移能力明显下降，凋亡细胞比例增加，以上差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论干扰Sphk1基因表达可有效抑制MCF-7细胞的增殖、迁移能力，同时诱导细胞发生凋亡，Sphk1基因可能成为一个潜在的乳腺癌治疗靶标。