人乳腺癌MCF-7他莫昔芬耐受细胞株EMT表型的鉴定及其机制的初步研究

目的观察乳腺癌细胞MCF-7发生他莫昔芬耐受后细胞形态的变化及上皮-间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）现象，并初步研究其机制。方法免疫荧光染色观察乳腺癌细胞MCF-7及其他莫昔芬耐药株MCF-7R细胞的形态；qRT-PCR、Westernblot检测两种细胞EMT相关标志蛋白的表达；Transwell法检测两种细胞的迁移能力；分别抑制PI3K-Akt及MAPK/Erk信号通路，检测MCF-7R细胞的迁移能力及EMT表型的变化。结果MCF-7细胞间的联系紧密，发生他莫昔芬耐受后，细胞间隙明显增大；MCF-7细胞发生他莫昔芬耐受后迁移能力明显增强，并发现E-钙粘素(E-cadherin)分布从细胞膜向细胞质转移，波形蛋白（vimentin）及纤维粘连蛋白（fibronectin）表达水平明显升高（P<0.05）；在耐药细胞中PI3K-Akt及MAPK/Erk信号通路均处于异常活化状态，抑制PI3K-Akt信号通路能明显抑制细胞的迁移能力，同时能使波形蛋白和纤维粘连蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论乳腺癌MCF-7细胞发生他莫昔芬耐受后其迁移能力增强可能与其发生EMT样表型有关。