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ISSN: 2333-9721
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人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖的影响

, PP. 2167-2172

Keywords: 人参总皂苷,KG-&alpha,细胞,促红细胞生成素,细胞凋亡,细胞衰老

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Abstract:

目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400mg/LTSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5U/LEPO,并设置EPO对照组。培养3、7、14d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-timePCR技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达。用Westernblot检测Bcl-2、Bax、CleavedCaspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性。结果人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100μmol/L为最适作用浓度,7d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-timePCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Westernblot检测经单独使用TSPG处理了7d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-EPOR表达明显下调,Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调,而Bax、CleavedCaspase-3表达增高,P53及P16无变化;然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加,Bcl-2、Bax、CleavedCaspase-3的表达没有变化。结论TSPG能下调细胞内由EPOR介导的Jak-STAT通路相关蛋白的表达,并降低EPOR的活性,进而下调Bcl-2、上调Bax和CleavedCaspase-3来促进细胞凋亡;而添加了EPO后这种作用被拮抗,抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。

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