组成型表达人呼吸道合胞病毒F212-489蛋白乳酸乳球菌的构建

目的构建能表达呼吸道合胞病毒截短F1蛋白（F212-489）的乳酸乳球菌，并检测表达蛋白的免疫反应性，以评估此重组菌作为口服活菌疫苗的可行性。方法PCR扩增绿色荧光基因egfp以及截短f1基因（f212-489），经TA克隆测序后，将目的片段构建至pMG36e载体，电转化至乳酸乳球菌中鉴定并表达，通过荧光显微镜检测绿色荧光蛋白EGFP的表达，通过SDS-PAGE和Westernblot检测F212-489蛋白的表达。结果荧光显微镜观察到重组菌pMG36e-egfp/MG1363有绿色荧光表达，Westernblot检测到重组菌pMG36e-f212-489/MG1363中F212-489蛋白的表达。结论构建的乳酸乳球菌能够组成型表达F212-489蛋白，其蛋白具备免疫反应性。