WAS基因缺陷小鼠巨细胞病毒急性感染模型的建立及感染特点

目的用小鼠巨细胞病毒（murinecytomegalovirus,MCMV）Smith株建立WAS基因缺陷小鼠（129S6/SvEvTac-Wastm1Sbs/J）全身播散型感染模型并观察感染特点。方法同窝内简单随机法选取实验组小鼠（129S6/SvEvTac）WASp-/-（雌雄各半），感染对照组小鼠（129S1/SvImNJ）WASp+/+6只，雌雄各半，6～8周龄。腹腔内接种0.2mL小鼠巨细胞病毒悬液1×105PFU；另设6只129S6小鼠为空白对照组。各组分别接种MCMV9d后处死小鼠，取小鼠唾液腺分离病毒，RT-PCR检测小鼠主要脏器组织中MCMVgB基因，HE病理染色观察小鼠脏器病理损害，流式细胞术检测WAS基因缺陷小鼠脾脏MCMV特异性细胞毒性T细胞（CTL）比例。结果与对照组野生型小鼠相比，实验组WASp-/-小鼠MCMV感染后一般状况差，体质量下降，活动少，耸毛反应明显，有死亡（1/6）。感染后第9天，实验组和感染对照组小鼠唾液腺均分离出巨细胞病毒，主要脏器心、肝、肺、肾和唾液腺中MCMVgB基因RT-PCR检测结果为阳性。实验组小鼠肺内MCMVgB基因mRNA含量显著高于对照组小鼠（P<0.05），空白对照组未检测出病毒。MCMV感染后主要脏器出现明显病理损害，其中肺部病理损害严重。流式细胞术检测结果显示WAS基因缺陷小鼠脾脏MCMVCTL比率与对照组比较无统计学差异（P=0.26）。结论腹腔注射MCMV1×105PFU成功建立成年WAS基因缺陷小鼠急性感染模型，观察到较对照组野生型小鼠更明显的、较重的急性感染反应；肺为感染主要靶器官之一；初次感染后脾脏MCMVCTL比例无明显变化。