PLCε基因通过NF-κB/p65途径抑制肾癌786-0细胞的增殖

目的探讨RNA干扰技术沉默人源磷脂酶Cε（PLCε）基因对肾癌786-0细胞p65核转位的调控，对786-0细胞增殖的影响及其机制。方法用携带PLCεshRNA基因的真核表达质粒pGenesil-PLCε转染786-0细胞，克隆形成实验检测786-0细胞的增殖，RT-PCR检测PLCε、c-Myc和COX-2mRNA的表达，Westernblot检测PLCε、c-Myc、COX-2和p65总蛋白及p65在细胞核的表达，细胞免疫荧光检测p65在细胞核与细胞质的定位。同时应用p65特异的抑制剂BAY11-7082处理786-0细胞，Westernblot检测c-Myc和COX-2蛋白的表达。结果转染pGenesil-PLCε质粒的786-0细胞生长明显受抑制；转染pGenesil-PLCε质粒细胞中PLCε、c-Myc和COX-2mRNA和蛋白表达水平均较对照组pGenesil-NP明显下调（P<0.01），且抑制核中p65蛋白的表达（P<0.01），细胞免疫荧光结果显示转染pGenesil-PLCε质粒组p65在细胞核中的表达较对照组pGenesil-NP明显下降；BAY11-7082抑制c-Myc和COX-2蛋白的表达（P<0.01），且呈时间浓度依赖性。结论沉默PLCε基因后可能是通过抑制p65的核转位及c-Myc、COX-2的表达抑制786-0细胞的增殖。