ApoE亚型蛋白对神经元轴突生长的影响

目的观察不同亚型ApoE蛋白（apolipoproteinE，ApoE）对神经元轴突生长的影响，探讨其可能机制。方法取新生C57野生鼠和APOE基因敲除鼠大脑皮质，进行神经元原代培养；在培养第1天，在APOE基因敲除鼠神经元培养基中加入重组人类ApoE2、3、4蛋白，将所培养细胞分为ApoE(-)组、ApoE2组、ApoE3组、ApoE4组和野生组5组。倒置相差显微镜观察神经元生长情况，测量其轴突长度和突起数量。免疫荧光对神经元轴突进行染色，并对神经元轴突荧光强度进行测定；Westernblot检测不同亚型ApoE对细胞分裂周期蛋白42（celldivisioncycle42，cdc42）表达的影响。结果培养第1、3、5天，野生组、ApoE2组、ApoE3组神经元平均轴突长度较ApoE(-)组及ApoE4组长(P<0.05)；培养第5天，ApoE(-)组、ApoE4组神经元突起数量分别为(1.80±0.45)个和(1.90±0.84)个，较野生组（3.80±0.84）个、ApoE2组（3.60±0.55）个、ApoE3组（3.40±1.14）个少（P<0.05）；野生组、ApoE2组、ApoE3组神经元轴突荧光强度分别为（54.10±7.32）、（52.40±6.33）、（50.50±8.21），较ApoE(-)组（37.20±9.30）和ApoE4组（39.00±8.32）强（P<0.05）；野生组、ApoE2组、ApoE3组cdc42蛋白表达高于ApoE(-)组、ApoE4组（P<0.05）。而在所有实验结果中野生组、ApoE2组与ApoE3组组间以及ApoE(-)组与ApoE4组组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论不同亚型ApoE蛋白对神经元轴突生长的影响不同，对tubulinⅢ及cdc42表达的影响也各不相同，后者可能是其影响神经元轴突生长的机制之一。