人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立

目的优化人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质样品制备方法，建立其亚细胞蛋白质组双向电泳技术。方法分步提取人肝癌细胞株QGY-7701细胞质、细胞膜和细胞核蛋白，采用不同的方法除盐、浓缩样品，然后分别采用2种不同的水化上样缓冲液重悬样品，进行双向凝胶电泳。结果使用三氯乙酸/丙酮的除盐效果好，样品损失少；采用上样缓冲液（7mol/L尿素+2mol/L硫脲+4％CHAPS+40mmol/LTris+65mmol/LDTT+2％两性电解质）有利于蛋白的溶解，获得更多的蛋白信息，检出的细胞质蛋白点数可达（995±53），细胞膜蛋白点数可达（1035±58），细胞核蛋白点数可达（893±45）。结论获得了清晰的人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳图谱。