抑制FoxO1基因表达的siRNA重组腺病毒载体的构建及功能鉴定

目的构建针对转录因子FoxO1的siRNA腺病毒载体，并鉴定重组腺病毒在人肝癌细胞系HepG2中对内源性FoxO1基因表达的影响。方法设计并合成针对FoxO1的siRNA的靶DNA序列，克隆于穿梭载体pAdTrack-CMV中，与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组，转染293细胞，包装得到含si？FoxO1的重组腺病毒，体外转染人肝癌细胞系HepG2，Westernblot检测FoxO1蛋白表达水平的变化。结果成功构建针对FoxO1的siRNA重组腺病毒载体，该重组腺病毒能显著抑制HepG2细胞中FoxO1蛋白的表达(P<0.01)。结论成功构建了针对FoxO1的siRNA重组腺病毒载体，能有效抑制HepG2细胞中FoxO1的表达。