辛伐他汀对K562细胞PI3K-AKT信号通路分子变化影响的体内外比较

目的通过检测辛伐他汀体外对K562细胞和裸鼠慢性粒细胞白血病组织（CML）K562细胞的影响，同时分别检测辛伐他汀处理后K562细胞PI3K-AKT信号通路中mRNA水平的变化，比较辛伐他汀在体内外所引起PI3K-AKT信号通路的分子变化，以分析辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的机制。方法体外培养CML细胞株K562细胞，MTT噻唑蓝法检测细胞增殖抑制率。流式细胞术检测辛伐他汀作用后的细胞周期和凋亡率的变化。另外，12只BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下接种K562细胞，构建Balb/c-nu/nu裸小鼠的慢性粒细胞白血病动物模型，采用缺口末端标记技术TUNEL（TdT-mediateddUTPnickendlabeling）法检测辛伐他汀诱导K562细胞早期凋亡的变化，用RT-PCR检测辛伐他汀在体内外K562细胞后N-ras分子和N-ras分子下游的PI3K-AKT信号通路的N-ras、PI3K、AKT1、IKK-β、NF-κB1mRNA水平的变化。结果辛伐他汀在体外能抑制K562细胞的增殖，使K562细胞停滞在G0/G1期，明显诱导K562细胞凋亡，PI3K-AKT信号通路大多数基因出现差异表达。不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞凋亡，并随剂量的增加凋亡率逐渐增高（P=0.000）;不同剂量的辛伐他汀能够引起PI3K、AKT1、NF-κB、IKK-βmRNA的明显差异表达（P=0.000，P=0.003）。但体外实验中的PI3K-AKT信号PI3K、AKT1mRNA水平的变化与体外实验PI3K、AKT1mRNA水平的变化呈现相反的差异表达。结论辛伐他汀体外能够引起参与K562细胞凋亡的N-ras分子和N-ras分子下游的PI3K-AKT信号通路的基因mRNA水平的变化，从一定角度说明辛伐他汀能依赖PI3K-AKT信号通路诱导K562细胞及其移植瘤细胞凋亡。但体内外实验存在不同的凋亡诱导机制。