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ISSN: 2333-9721
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脂多糖结合蛋白与CD14结合位点模拟肽的初步筛选

, PP. 1572-1575

Keywords: LBP,CD,噬菌体肽库,模拟肽

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Abstract:

目的应用噬菌体随机12肽库筛选脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharidebindingprotein,LBP)与CD14结合位点的多肽序列。方法以CD14为固相筛选分子,对噬菌体12肽库进行4轮亲合筛选,采用酶联免疫吸附(ELISA)法鉴定筛选后的噬菌体克隆与CD14的结合活性,取结合活性较高的克隆进行DNA测序,推导其多肽序列并与LBP序列比对,再进行竞争抑制实验检测筛选噬菌体与LBP竞争结合CD14的效力。结果挑取的20个噬菌体克隆中,16个结合实验鉴定阳性,取6个亲和力最高的克隆测序,得到3条不同编码的12肽序列(FHRWPTWPLPSP、MHRHPPPITLPL和AAFHRAHHLTSP),3条多肽与LBP一级结构同源性低,为模拟肽。6个噬菌体克隆有较高的竞争抑制率。结论用噬菌体12肽库成功筛选出LBP与CD14结合位点的模拟肽。

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