整合素β1基因剔降血管内皮细胞株的建立及其增殖活力研究

目的构建人整合素（integrin）β1基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体（pGenesil-integrinβ1），建立integrinβ1剔降血管内皮细胞株，观察integrinβ1对EA.hy926细胞株增殖的影响。方法合成integrinβ1siRNA模板，经退火后插入到pGenesil-1荧光载体。阳性重组质粒经DoTAP转染至EA.hy926细胞中。蛋白印迹观察pGenesil-integrinβ1表达载体对目的蛋白integrinβ1表达的抑制效率，绘制转染基因前后细胞生长曲线。结果经酶切、测序验证，pGenesil-integrinβ1重组质粒构建成功。转染细胞后，可明显抑制integrinβ1的表达。整合素β1基因剔降血管内皮细胞株细胞增殖减慢，与EA.hy926细胞株相比，生长曲线右移。结论成功构建了pGenesil-integrinβ1重组质粒，建立了integrinβ1下调细胞株，下调integrinβ1表达对血管内皮细胞增殖产生负调控作用。