VEGF基因沉默抑制HCT116裸鼠移植瘤生长及血管生成的实验研究

目的应用RNAi技术沉默血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）基因,探讨其对人结肠癌细胞系HCT116裸鼠移植瘤生长及其血管生成的影响。方法将自行构建的以VEGF基因为靶向表达短发夹状RNA的重组质粒(pAVU6＋27-VEGF-siRNA)转染到结肠癌HCT116细胞株中（C组），以空质粒(pAVU6＋27)转染为阴性对照（B组），经G418筛选出阳性克隆细胞，未转染质粒的HCT116细胞株为空白对照（A组），建立裸小鼠皮下移植瘤模型。通过测量移植瘤的质量、体积观察移植瘤生长；免疫组化检测瘤组织中VEGF蛋白表达及组织内的微血管密度（microvesseldensity，MVD）改变。结果C组肿瘤瘤块的体积（0.169±0.009）cm3和质量（0.192±0.022）g明显小于A、B组(P<0.05)。A、B组荷瘤组织中VEGF均表达强阳性，表达位于肿瘤细胞的细胞质及细胞膜上，呈棕黄色。C组荷瘤组织中VEGF呈弱阳性表达，组间差异显著(P<0.05)。C组荷瘤组织中MVD明显小于两对照组，组间差异显著(P<0.05)。VEGF表达与MVD呈显著正相关(r=0.810,P<0.01)。结论应用RNAi技术沉默VEGF基因能明显抑制人结肠癌细胞系HCT116裸小鼠移植瘤的生长，其机制与其抑制移植瘤中VEGF的表达和瘤组织内血管生成有关。