人TALL-1基因在毕赤酵母中的分泌表达与鉴定

目的研究在毕赤酵母（PichiaPastoris）系统中人TALL-1基因的分泌表达，获得具有生物活性的重组TALL-1。方法将人TALL-1基因插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中，用SacⅠ将重组质粒线性化，电转化PichiaPastorisGS115感受态细胞，筛选阳性整合子并进行甲醇诱导表达，采用MTT对表达产物进行初步的生物活性检测。结果经过诱导表达条件的优化，人TALL-1在酵母培养基BMMY中实现了分泌表达；免疫印迹和酶联免疫检测结果显示，重组产物可以结合其特异抗体；生物学活性检测证实其可抑制Hela细胞增殖。结论在毕赤酵母系统中实现了人TALL-1的分泌表达，具有生物学活性的重组TALL-1分子可以用于进一步的结构与功能研究。