运用噬菌体展示随机肽库筛选与内毒素结合的高亲和性多肽

目的从噬菌体展示随机肽库中筛选与内毒素结合的多肽序列，并进行鉴定。方法以内毒素脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）为靶分子对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮亲和筛选，获得与LPS结合的噬菌体克隆，应用结合实验和克隆斑抑制实验进一步确证。挑选结合力强的克隆进行DNA测序，推导出呈现的多肽序列，应用生物信息学软件进行多肽序列分析和同源性分析。结果经4轮亲和筛选从噬菌体展示随机十二肽库中筛选获得了86个克隆，挑选12个结合力强的克隆进行DNA序列测序及生物信息学分析，结合本项目组的噬菌体展示随机七肽库筛选结果推导出呈现的多肽序列为HWQWPHWSPPP（命名为P11肽）。检索相关数据库发现此肽序列未被申请专利，体内约908种蛋白与其结构相匹配，其中包含有与LPS相互作用的位点。结论通过对噬菌体展示随机肽库的淘选，获得与LPS结合的高亲和性多肽，为进一步以这些多肽为先导物进行定向进化研究提供了实验依据和结构基础。