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ISSN: 2333-9721
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抗坏血酸诱导体外培养小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞

, PP. 1722-1725

Keywords: 小鼠胚胎干细胞,心肌细胞,抗坏血酸,细胞培养

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Abstract:

目的探讨采用抗坏血酸诱导体外培养小鼠胚胎干细胞(mouseembryonicstemcell,mESC)分化为心肌细胞的可行性。方法未分化ES细胞在滋养层上长至汇合,胰酶消化成单个细胞经旋转生物反应器(RCCS)制备拟胚体(embryoidbodies,EBs),EBs贴壁后用抗坏血酸诱导分化为心肌细胞。通过光镜观察跳动的心肌细胞,采用免疫组织化学、激光共聚焦显微镜(CLSM)和RT-PCR的方法鉴定心肌细胞。结果抗坏血酸能有效地诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞的分化,诱导效率为90%;分化的心肌细胞自发而有节律地收缩,心肌肌钙蛋白T(cTnT)、α-辅肌动蛋白(α-actinin)、肌动蛋白(actin)表达阳性。此外,分化的心肌细胞还表达调控心肌发育的基因α-MHC、β-MHC。结论抗坏血酸能有效地诱导体外培养小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞。

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