Livin反义寡核苷酸诱导人肾癌细胞凋亡及其机制的研究

目的探讨Livin反义寡核苷酸(ASODN)对人肾癌细胞株786-OLivinmRNA及蛋白表达的抑制作用以及对细胞凋亡的影响。方法设计合成全硫代磷酸化修饰的LivinASODN，脂质体辅助转染至786-O细胞内。采用RT-PCR检测转染后LivinmRNA的变化，细胞免疫化学、激光扫描共聚焦显微镜观察Livin蛋白在细胞内的分布、转染后表达的变化及细胞形态的变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化，激酶法测定Caspase3活性的变化。结果转染LivinASODN后，RT-PCR显示786-O细胞表达LivinmRNA减少(P<0.01)，激光扫描共聚焦显微镜下见细胞表达Livin蛋白减少、细胞形态发生变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率显著增加(P<0.01)，Caspase3活性明显增加(P<0.01)。结论LivinASODN能明显下调786-O细胞Livin基因的表达，诱导细胞凋亡。抑制Caspase3活性是Livin抑制细胞凋亡的途径之一。