过表达Bcl-2肾小管上皮细胞株的建立及Bcl-2逆转录病毒对抗肾小管-上皮细胞凋亡的研究

目的建立稳定过表达Bcl-2蛋白的肾小管上皮细胞，探讨Bcl-2过表达对抗大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用。方法Bcl-2逆转录病毒感染培养肾小管上皮细胞株HK-2，经G418抗性筛选，PCR鉴定并命名为HK-2Bcl-2；原位杂交检测细胞Bcl-2mRNA表达水平；甘油诱导大鼠急性肾功能衰竭模型，采用含重组Bcl-2浓缩逆转录病毒液，感染大鼠肾小管上皮细胞，采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白表达，原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡变化。结果PCR和原位杂交显示G418抗性细胞克隆过表达Bcl-2；甘油注射后大鼠出现急性肾功能衰竭，Bcl-2逆转录病毒感染肾小管上皮细胞后，Bcl-2蛋白表达上调，并能显著对抗肾小管上皮细胞凋亡。结论成功建立过表达Bcl-2蛋白的肾小管上皮细胞株HK-2Bcl-2；Bcl-2逆转录病毒显著抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡。