Kupffer细胞Fas配体的表达及其对移植肝内淋巴细胞的杀伤作用

目的观察移植肝脏中Kupffer细胞（KCs）和T淋巴细胞（Tlymphocytes,TLCs）中Fas、FasL基因和蛋白的表达，以及KCs对侵入肝脏内的淋巴细胞的细胞毒性作用。方法肝移植后0、48h分离肝移植组、氯化钆（GdCl3）组动物肝脏的KCs和TLCs，并对TLCs进一步分类；用RT-PCR法测定KCs和TLCs中Fas、FasL基因表达，用免疫组化、激光扫描共聚焦显微镜和Westernblot蛋白印迹等方法测定KCs和TLCs中Fas、FasL蛋白质表达；观察不同培养条件下淋巴细胞凋亡与KCs的相互作用。结果GdCl3组分离出的KCs显著少于肝移植组，淋巴细胞数量及CD8+T细胞显著多于肝移植组（P<0.05），免疫组化和激光共聚焦显微镜显示GdCl3组FasL阳性KCs显著少于肝移植组（P<0.05），2组Fas阳性淋巴细胞无显著差异（P>0.05）；RT-PCR和Westernblot显示KCs中FasLmRNA及蛋白表达GdCl3组较弱（P<0.05），2组淋巴细胞中Fas、FasLmRNA无显著差异（P>0.05）。GdCl3组中分离出的KCs对TLCs杀伤率明显低于肝移植组（P<0.05），抗FasL抗体对KCs杀伤力有抑制作用。结论KCs能表达FasL蛋白，并通过Fas、FasL途径杀伤移植肝脏中的淋巴细胞，诱导移植肝脏产生免疫耐受。GdCl3能阻止KCs中FasL基因和蛋白表达，抑制肝移植中免疫耐受的产生。