2种腺相关病毒介导的增强型绿色荧光蛋白对人成纤维细胞转染效率的研究

目的比较2种不同腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)介导的增强型绿色荧光蛋白对人皮肤成纤维细胞（humanfibroblast,HFB）的转染效率。方法原代分离培养人皮肤成纤维细胞并鉴定，按照感染复数（multipleofinfection，MOI）为104、105、106转染传2代的人成纤维细胞，流式细胞检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的转染效率,倒置荧光显微镜观察转染后的荧光强度。MTT法检测AAV2-EGFP和AAV2/1-EGFP对HFB的毒性。结果腺相关病毒AAV2？EGFP对HFB的转染效率随着MOI增加而增高,MOI为104时转染效率为(7.68±1.18)%，当MOI达到105后，转染效率稳定在(22.16±5.59)%,随着MOI增加，最高至MOI106转染效率无显著提高。而病毒AAV2/1对于HFB的转染效率在MOI为106转染效率仅为(3.47±0.93)%。2种病毒在转染过程中，细胞生长正常,MTT显示各转染组与未转染组的吸光度值无统计学差异。结论AAV2载体对体外培养的HFB转染效率高于AAV2/1，但2种病毒载体对人皮肤成纤维细胞转染效率均不高，AAV2/1-EGFP对HFB几乎无感染能力。