肠出血性大肠杆菌O157∶H7志贺毒素ⅡA1亚单位单克隆抗体的制备和生物学特性鉴定

目的制备出高效价的抗志贺毒素ⅡA1亚单位(STX2A1)的单克隆抗体。方法以重组GST-STX2A1融合蛋白作为免疫抗原，免疫BALB/c小鼠，运用细胞杂交瘤技术制备，以天然STX2毒素为筛选抗原，采用间接ELISA法筛选产生针对STX2A1的单克隆抗体细胞株；以体内诱生法产生腹水，并采用ProteinA-Sepharose柱对其纯化，快速定性试纸鉴定McAb的Ig亚类，采用间接ELISA相加实验鉴定抗原识别表位。结果获得3株产生针对STX2A1的单克隆抗体细胞株STX2-1A3、STX2-1E10、STX2-3A7，Ig亚类分别为IgG1λ型、IgG1κ型和IgG3κ，亲和力常数分别为5.76×109、1.21×109和3.97×108。结论成功制备3株稳定分泌抗STX2A1的杂交瘤细胞株，产生的单克隆抗体特异性好，亲和力高，能与天然STX2A亚单位反应。