穿膜肽TAT的固相合成及体外活性研究

目的以固相合成法合成穿膜肽TAT,并对合成产物进行活性评价。方法采用Nа-芴甲氧羰基(fluorenylmethyloxyloxycarbonyl,FMOC)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成穿膜肽TAT。应用高效液相色谱和质谱仪测定其纯度及相对分子质量；荧光显微镜观察穿膜肽TAT介导增强型绿色荧光蛋白（enhancedgreenfluorescentprotein,pEGFP）质粒在体外培养人脐静脉内皮细胞中的转染效果以评价穿膜肽TAT的生物活性；MTT法检测穿膜肽TAT与质粒DNA复合物对人脐静脉内皮细胞生长活性的影响。结果高效液相色谱和质谱鉴定所制备穿膜肽TAT的纯度为96.6%，相对分子质量1880。它能够携带质粒DNA穿过细胞膜进行基因转染，并对细胞活性无明显影响。结论采用Fmoc固相肽合成法可以成功地合成有生物活性的穿膜肽TAT。