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ISSN: 2333-9721
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大鼠神经球蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

, PP. 326-328

Keywords: 神经球蛋白,原核表达,多克隆抗体

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Abstract:

目的克隆Wistar大鼠神经球蛋白(NGB)基因,通过原核表达制备其多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础。方法从雄性Wistar大鼠脑组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到cDNA,测序证明该基因序列正确后,亚克隆入pET-28a(+)载体中,通过双酶切和测序确定序列和阅读框正确。转化大肠杆菌BL21菌株,获得可溶性表达产物,经鉴定、纯化后免疫新西兰兔,分离血清,ELISA法测定抗体效价。结果神经球蛋白多克隆抗体效价达1∶100000,此多抗可以与293细胞内表达的重组蛋白发生很好的抗原抗体反应。结论成功制备了兔抗NGB的多抗,为后续研究提供了重要的实验材料。?

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