糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定

目的构建糖皮质激素受体（glucocorticoidreceptor，GR）结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域，克隆入pMD18-T，测序正确后，再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中，再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中，并用Westernblot分析诱饵蛋白的表达情况，同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域，并分别成功克隆到pMD18-T和pGBKT7中，测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中，无毒性和自激活作用，Westernblot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。