TCF4/pcDNA3.0表达载体的构建及其在毛乳头细胞中的表达

目的构建TCF4/pcDNA3.0表达载体,为深入研究T细胞因子4(Tcellfactor4,TCF4)基因在毛乳头细胞生物学功能调控中的作用和机制奠定基础。方法从凝集性生长毛乳头细胞中提取总RNA，RT-PCR获得带有酶切位点的TCF4基因，亚克隆入pCDNA3．0载体中，并通过双酶切和测序确定序列和阅读框正确。稳定转染到毛乳头细胞中进行表达,检测稳定转染前后TCF4表达的变化。结果从人毛囊毛乳头细胞中获得TCF4基因克隆；成功构建了真核表达载体。经过稳定转染在毛乳头细胞中上调了TCF4基因mRNA和蛋白水平表达,促进了毛乳头细胞的增殖和外分泌功能。结论TCF4/pcDNA3.0表达载体能在真核细胞中表达。TCF4基因可以促进毛乳头细胞增殖。