VEGF165基因转染EPCs移植对大鼠阿霉素肾病组织学的影响

目的构建含血管内皮生长因子165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF165)，转染血管内皮祖细胞(EPCs)后，观察其对阿霉素肾病大鼠肾脏组织学的影响。方法用细菌内同源重组法构建含VEGF165基因的重组腺病毒Ad-VEGF165，通过PCR和Westernblot鉴定所构建的腺病毒。贴壁法体外培养获得大鼠骨髓来源的EPCs，Ad-VEGF165体外转染EPCs，检测转染后目的基因的蛋白表达。大鼠阿霉素肾病模型形成过程中，尾静脉注射转染Ad-VEGF165的EPCs，在第16周时观察肾脏组织学变化。结果PCR和Westernblot证实构建的重组腺病毒含有目的基因，滴度为1.4×1010PFU/ml；培养第6天的EPCs用于Ad-VEGF165转染，转染后24h，培养上清中VEGF蛋白表达较对照组和转染前增加。转染了VEGF165基因的EPCs移植后第12周（切肾术后16周），转染组的肾小球硬化和肾小管间质纤维化的程度明显较肾病组轻。结论转染了VEGF165基因的EPCs可以减轻阿霉素肾病的肾小球和肾小管的损伤程度，为VEGF在慢性肾脏病治疗提供了实验基础。