氨溴索对铜绿假单胞菌生物膜结构的影响

目的建立铜绿假单胞菌生物膜(biofilm,BF)模型,探讨氨溴索对粘液型铜绿假单胞菌成熟BF的结构影响。方法平板培养法培养铜绿假单胞菌7d,得到成熟BF，用扫描电镜（scanningelectronmicroscope，SEM）观察氨溴索对BF形态结构的影响；激光共聚焦显微镜（confocallaserscanningmicroscopy,CLSM）结合BF图像结构分析软件（imagestructureanalyer，ISA)对BF结构参数分析；荧光显微镜定性观察氨溴索对BF内活菌的作用,并测定氨溴索单独作用以及与环丙沙星联用后BF内活菌的荧光强度。结果氨溴索作用后电镜观察可见BF被破坏，基质样物变稀疏,仅见少量散在细菌。ISA软件定量分析显示：2mg/ml氨溴索作用后，BF厚度、平均扩散距离（averagediffusiondistance，ADD）和结构熵（textualentropy，TE）均减少(P<0.05);区域孔率（arealporosity，AP）增加(P<0.05)。0.75mg/ml氨溴索干预后，有同样趋势，但效应不如高浓度明显。用荧光显微镜定性观察，当氨溴索浓度大于0.49mg/ml时，BF内活菌数减少。同时，氨溴索与环丙沙星存在协同作用(F=15.1,？P<0.05),且随着氨溴索浓度升高，协同作用增强。结论氨溴索可影响铜绿假单胞菌成熟BF形态结构,从而增强抗生素的杀菌活性。