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ISSN: 2333-9721
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诱导细胞mtDNA缺失以及再转入线粒体后对肿瘤细胞凋亡的影响

, PP. 2225-2227

Keywords: 线粒体DNA,胞质体,ROS,细胞凋亡,肿瘤

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Abstract:

目的对比研究mtDNA缺失以及再转入线粒体后细胞凋亡的变化。方法在成功构建ρ0SK-Hep1细胞和转线粒体细胞SK-Hep1Cyb的基础上,采用AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位(ΔΨm);Westernblot检测细胞Bcl-2、Bax表达水平;免疫荧光染色观测Bcl-2细胞内分布。结果SK-Hep1、ρ0SK-Hep1和SK-Hep1Cyb细胞凋亡率分别为(2.01±0.11)%、(0.37±0.08)%和(2.10±0.12)%。ρ0SK-Hep1对细胞凋亡有明显抗性(P<0.05)。ρ0SK-Hep1细胞内DCFDA荧光强度较SK-Hep1细胞显著增强(35.5与15.9,P<0.01);转入线粒体后,SK-Hep1Cyb细胞DCFDA荧光强度较ρ0SK-Hep1细胞明显下降(17.4与35.5,P<0.01)。ρ0SK-Hep1细胞MitoTrackerRed荧光强度较SK-Hep1细胞显著减低(55.0与65.9,P<0.05);转入线粒体后,SK-Hep1Cyb细胞MitoTrackerRed荧光强度与SK-Hep1细胞基本一致(67.4与65.9,P>0.05)。ρ0SK-Hep1细胞线粒体Bcl-2、Bax表达增多,Bcl-2/Bax比值增加(P<0.01)。SK-Hep1Cyb细胞线粒体Bcl-2/Bax值下降。结论mtDNA缺失肿瘤细胞对细胞凋亡有明显拮抗。Bcl-2线粒体转位、线粒体Bcl-2/Bax值增加、ROS产生增多可能参与细胞凋亡拮抗的形成。

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