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ISSN: 2333-9721
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人Ⅰ型丙氨酸氨基转移酶单克隆抗体的制备及鉴定

, PP. 2001-2004

Keywords: Ⅰ型丙氨酸氨基转移酶,单克隆抗体,制备与鉴定

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Abstract:

目的通过构建人Ⅰ型丙氨酸氨基转移酶(ALT1)的原核表达载体,并用纯化的ALT1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备有生物活性的单克隆抗体。方法用GST-ALT1融合蛋白作为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗ALT1的单克隆抗体,用间接ELISA、Dot-Elisa、Westernblot等方法对抗体的抗原结合特性进行鉴定。结果获得1株能稳定分泌抗ALT1单克隆抗体的细胞株8A9,亚类鉴定这种单抗为IgG2。间接ELISA法测定细胞株腹水抗体的效价为10×105。Dot-ELISA、Westernblot显示ALT1单克隆抗体能特异性地识别免疫原。结论成功制备ALT1单克隆抗体。

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