人乳头瘤病毒16E6基因沉默对鼻咽癌细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响

目的观察针对人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)16E6基因的RNA干扰（RNAinterfering,RNAi）对人鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)HNE-1细胞侵袭转移能力及细胞周期的影响，探讨HPV16E6基因作为鼻咽癌基因治疗标靶的可行性。方法根据基因库上的HPV16E6mRNA序列，设计合成针对HPV16E6的siRNA，转染HNE-1细胞，采用RT-PCR及Westernblot分析E6基因的表达，利用侵袭实验检测细胞的侵袭能力，MTT法检测细胞的生长增殖，流式细胞术检测细胞周期。结果针对HPV16E6的siRNA下调鼻咽癌HNE-1细胞株E6mRNA和蛋白表达水平，分别下调66.3%、56.7%（P<0.05）；侵袭实验结果显示，siRNA转染组的穿膜细胞数为(45.3±4.0),显著低于阴性对照组[（147.7±4.7）,P<0.05]；转染组细胞的增殖受到抑制，与阴性对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）；流式细胞术显示细胞阻滞于G0/G1期。结论siRNA可以有效干扰鼻咽癌HNE-1细胞内HPV16E6基因的表达，进而影响HNE-1细胞的侵袭转移能力，并抑制肿瘤细胞的生长增殖，使细胞周期重新分布。