重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马p-Akt和XIAP的影响

目的观察重组人红细胞生成素(recombinanthumanEPO，rHuEPO)对戊四氮（Pentylenetetrazol,PTZ)点燃的癫痫持续状态(statusepilepticus，SE)的SD大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)和X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linkedinhibtorofapoptosisprotein,XIAP)表达的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3kinase，PI3K)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制。方法采用PTZ制作大鼠SE模型，将点燃后的大鼠随机分为PTZ组（PTZ+NS)、rHuEPO组（PTZ＋rHuEPO）、LY294002组（PTZ＋LY294002＋rHuEPO）、LY294002溶剂二甲基亚砜(DMSO)对照组（PTZ＋DMSO＋rHuEPO）,正常对照组腹腔注射生理盐水（n=35）。观察大鼠行为学和脑电图的改变;TUNEL法检测海马神经细胞的凋亡情况；免疫组织化学法观察p-Akt、XIAP的表达;RT-PCR法检测各组大鼠海马XIAPmRNA的表达;Westernblot法检测各组大鼠海马Akt、p-Akt蛋白的表达。结果正常对照组仅见少量凋亡细胞，p-Akt和XIAP阳性细胞、p-Akt蛋白、XIAPmRNA均有少量表达；PTZ组与rHuEPO组、LY294002组、LY294002溶剂DMSO对照组比较，p-Akt和XIAP阳性细胞数、p-Akt蛋白表达及XIAPmRNA表达均减少（P<0.05），凋亡细胞数增加（P<0.05）；rHuEPO组、LY294002溶剂DMSO对照组与LY294002组比较，p-Akt和XIAP阳性细胞数、p-Akt蛋白表达及XIAPmRNA表达均增加（P<0.05），凋亡细胞数减少（P<0.05）。结论rHuEPO在SE模型中活化了PI3K/Akt，提高p-Akt蛋白的表达,进而对线粒体凋亡途径的相关调控因子XIAP的表达进行了调控，从而介导线粒体凋亡途经,发挥抗凋亡、促存活的神经保护作用。