靶向STAT5的siRNA诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡

目的采用RNA干扰技术阻断STAT5基因的表达，观察其对人肝癌SMMC-7721凋亡的影响。方法构建3种靶向STAT5的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体，采用LipofectamineTM2000转染肝癌细胞SMMC-7721；分别采用半定量RT-PCR、Westernblot技术检测转染前后SMMC-7721细胞STAT5mRNA和蛋白质表达的变化；采用透射电镜技术观察细胞形态变化；流式细胞术检测细胞凋亡率。结果3条靶向STAT5的序列特异性的siRNA可以有效地抑制SMMC-7721细胞STAT5mRNA和蛋白质表达，STAT5mRNA表达抑制率分别为70.43%、43.02%、45.07%，STAT5蛋白表达抑制率分别为67.45%、37.36%、41.86%；转染靶向STAT5的siRNA真核表达载体48h后出现凋亡细胞的典型形态学变化，并诱导25.61%的SMMC-7721细胞发生凋亡。结论靶向STAT5的siRNA真核表达载体可以有效、特异地阻断SMMC-7721细胞STAT5基因的表达，并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡，STAT5siRNA在人肝癌的基因治疗中可能具有潜在的应用价值。