ORC1基因RNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞表型的影响

目的以RNA干扰抑制血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)ORC1基因,探讨ORC1基因表达抑制后对VSMCs表型的影响。方法实验设置正常对照组、阴性siRNA组及阳性siRNA组。应用Westernblot检测ORC1基因表达的变化；免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观察细胞形态结构；应用流式细胞仪检测细胞表型标志蛋白表达。结果①siRNA转染后，阳性siRNA组ORC1基因表达水显著降低，而正常对照组及阴性siRNA组间ORC1基因表达水平无显著差异。②siRNA转染后，阳性转染组细胞呈现收缩型形态特征，空白对照组及阴性对照组细胞呈现合成型形态特征。③siRNA转染使ORC1表达减弱后，VSMCs收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMactin）和平滑肌肌动蛋白重链2（SM-2）表达水平明显升高，合成型标志物骨桥蛋白（osteopontin）表达水平明显降低，空白对照组及阴性对照组间3种标志物表达水平无显著差异。结论RNA干扰介导的ORC1基因沉寂可促使VSMCs由合成型向收缩型转化。