利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

目的构建登革2型病毒（denguevirusserotype2,DV2）非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B，进行DNA免疫，制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段，构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠，制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B，该重组质粒具有良好的免疫原性，免疫小鼠后所获的抗血清，抗体效价达1∶3200，Westernblot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。