受体作用蛋白在异硫氰酸苯乙酯诱导人急性白血病细胞凋亡中的作用

目的探讨受体作用蛋白(receptor？interactionproteins，RIP)在异硫氰酸苯乙酯(phenethylisothiocyanate，PEITC)诱导人白血病细胞凋亡中的作用。方法将0、2、4、6、8μmol/L异硫氰酸苯乙酯作用于U937细胞3、6h，观察量效关系。用8μmol/L异硫氰酸苯乙酯作用U937细胞1、3、6、9、12、24h，观察时效关系。采用AnnexinV/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡。用Westernblot法检测细胞凋亡相关蛋白蛋白聚ADP核糖聚合酶［poly(ADP-ribose)polymerase,PARP］、Caspasep-3、Caspasep-8及RIP的表达。结果异硫氰酸苯乙酯在2、4、6、8μmol/L作用于U937细胞3h分别引起9%、25%、44%和56%的细胞发生凋亡，6h分别引起16%、28%、51%和82%的细胞发生凋亡，呈明显的量效关系。8μmol/L的异硫氰酸苯乙酯作用U937细胞1、3、6、9、12、24h分别引起12%、57%、79%、86%、90%和91%的细胞发生凋亡，呈明显的时效关系。Westernblot结果表明，异硫氰酸苯乙酯引起凋亡蛋白酶Caspase-3、Caspase-8的降解/活化增加，促进凋亡作用底物PARP的降解增加。异硫氰酸苯乙酯还可引起受体作用蛋白表达降低及RIP降解增加。结论异硫氰酸苯乙酯可引起人白血病细胞发生凋亡，其分子机制可能与死亡受体途径有关，其中受体作用蛋白的降解可能在异硫氰酸苯乙酯诱导细胞凋亡中起着重要作用。