人膀胱癌荷瘤鼠中shRNA沉默ΔNp63基因对肿瘤的抑制和cyclinD1表达的影响

目的利用RNA干扰（RNAinterference，RNAi）技术沉默ΔNp63基因的表达，研究其对人膀胱癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用，同时检测ΔNp63基因被抑制后对细胞周期素D1（cyclinD1）表达的影响。方法建立人膀胱癌裸鼠皮下移植模型，构建ΔNp63基因特异性shRNA（shorthairpin）表达质粒，将表达质粒转染荷瘤鼠瘤体。将符合实验条件的15只裸鼠分为3组：ΔNp63-shRNA组、Control-shRNA组与生理盐水组，每组5只。观察各组肿瘤生长情况、瘤组织超微结构的改变，检测ΔNp63基因和蛋白、增殖细胞核抗原（PCNA）和cyclinD1蛋白表达的变化。结果转染质粒8周后，ΔNp63-shRNA组与生理盐水组瘤体积有显著性差异(P<0.01)，抑瘤率为74.44%，Control-shRNA组与生理盐水组体积无显著性差异(P>0.05)。病理结果显示ΔNp63-shRNA组肿瘤生长受到抑制，细胞核分裂象减少，可见大量肿瘤细胞坏死和凋亡、炎症细胞浸润。RT-PCR结果显示ΔNp63-shRNA组ΔNp63基因表达降低。免疫组化结果显示ΔNp63、PCNA、cyclinD1蛋白表达均降低。结论ΔNp63特异性shRNA质粒表达载体沉默ΔNp63基因后，可显著抑制人膀胱癌裸鼠肿瘤的生长，ΔNp63可能通过抑制cyclinD1的表达而抑制肿瘤的细胞增殖。