巯乙磺酸钠对大肠杆菌生物膜早期黏附及胞外聚合物的影响

目的研究巯乙磺酸钠对大肠杆菌生物膜(biofilm，BF)早期黏附及胞外聚合物（extracellularpolymericsubstances，EPS)的影响。方法采用了平板菌落计数法检测高浓度（2mg/ml）、低浓度（0.5mg/ml）巯乙磺酸钠在不同时间点对大肠杆菌黏附的影响；采用免疫荧光技术标记多糖和细菌，利用激光扫描共聚焦显微镜定性观察细菌黏附及胞外多糖变化；利用硫酸-苯酚法定量各组细菌胞外多糖的产量；利用考马斯亮蓝染料结合法(Bradford法)测定胞外蛋白含量。结果巯乙磺酸钠干预2、4、6、8h后，与生理盐水对照组比较，各组黏附细菌数均有所减少（P<0.05）,高浓度组较低浓度组更明显（P<0.05）；经巯乙磺酸钠干预8h，经FITC-ConA和PI双染后，激光扫描共聚焦显微镜观察见菌落稀疏，散在分布，胞外多糖减少,稀薄，以高浓度为甚；胞外多糖定量实验中，高浓度组胞外多糖/细菌干质量(13.57±0.59)μg/mg、低浓度组（27.77±0.77）μg/mg，分别与生理盐水对照组(35.73±0.44)μg/mg比较，均降低了胞外多糖的产生（P<0.05），高浓度组较低浓度组更明显（P<0.05）；胞外蛋白定量实验中，高浓度组胞外蛋白/细菌干质量(7.76±0.32)μg/mg、低浓度组（17.59±0.86）μg/mg分别与生理盐水对照组(23.31±1.36)μg/mg比较，均降低了胞外蛋白的产生（P<0.05），高浓度组较低浓度组更明显（P<0.05）。结论巯乙磺酸钠可显著减少大肠杆菌黏附及产EPS的能力。