DC-CIK细胞对人肝癌HEPG2细胞周期、凋亡的影响

目的探讨细胞因子从肝癌患者外周血贴壁单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMCs)诱导的树突状细胞（dendriticcells，DCs）与杀伤细胞（cytokineinducedkiller,CIK）对人肝癌HEPG2细胞系周期、凋亡的影响。？方法？用肝癌患者肝癌组织裂解物（肿瘤抗原）致敏经GM-CSF、TNF-α及IL-4等诱导该患者PBMC产生的DCs。用IFN-γ、IL-2和人CD3单克隆抗体（humanCD3monoclonalantibody,hCD3mAb)等诱导该PBMC的悬浮细胞产生CIK细胞。用Transwell培养小室将DC-CIK细胞与HEPG2细胞在同一培养体系内经该小室膜分隔培养24、48h。流式细胞仪检测该HEPG2细胞的周期；AnnexinV-PI双染法检测其凋亡。RT-PCR、Westernblot分别检测凋亡相关基因Bax及其编码蛋白的表达。结果DC-CIK细胞可明显影响人HEPG2细胞生长周期，两者共培养，可将HEPG2细胞系阻滞于G1期。DC-CIK细胞能显著诱导HEPG2细胞的凋亡，与对照相比，其凋亡诱导率差异显著（P<0.01)。基因与蛋白水平检测表明，DC-CIK细胞可致HEPG2细胞系的凋亡相关基因Bax表达明显上调。结论肝癌患者DC-CIK细胞可明显抑制肝癌HEPG2细胞系的生长，显著诱导该细胞凋亡，且该凋亡诱导具“时间-依赖”与“细胞数量-依赖”特性。