CTLA4Ig和CD40LIg基因修饰骨髓间充质干细胞在异种胰岛移植排斥反应中的作用

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白（CTLA4Ig）和T细胞分化群40补体免疫球蛋白（CD40LIg）基因修饰骨髓间充质干细胞（MSCs）在异种胰岛移植排斥反应中的作用及其可能的机制。方法将SD大鼠胰岛细胞移植到Wistar糖尿病大鼠肾包膜下，建立SD-Wistar大鼠的异种胰岛移植模型，用携带CTLA4Ig和CD40LIg基因重组腺病毒感染的MSCs进行干预治疗。取造模成功的糖尿病大鼠45只，按随机数字表法分为3组（每组15只）：对照组只植入胰岛细胞；单纯MSCs组植入胰岛细胞和MSCs；基因转染MSCs组植入胰岛细胞及CTLA4Ig和CD40LIg基因转染的MSCs。观察胰岛移植后糖尿病大鼠的生存情况、血糖变化和移植物病理形态学的改变，检测移植物CTLA4Ig、CD40LIg和胰岛素的表达以及胰岛移植大鼠细胞因子水平的变化。结果①糖尿病大鼠血糖在移植后2d降至正常，对照组血糖平均在移植后8d升高，单纯MSCs组和基因转染MSCs组血糖分别在21d和49d升高。②对照组、单纯MSCs组和基因转染MSCs组，移植物存活时间分别为（10.2±2.1）、（23.5±6.8）和（52.1±7.3）d，各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)；移植大鼠的生存时间分别为（21.3±5.3）、（49.7±8.5）、（95.8±13.8）d，各组间比较和移植物存活时间相似(P<0.05)。③对照组TNF-α和IL-2的水平在移植后1周内均急剧上升，而IL-4和IL-10的水平较移植前显著下降(P<0.01)；2个治疗组细胞因子水平的变化和对照组正好相反。④2个治疗组移植物内可见成片的胰岛细胞团，未见明显淋巴细胞浸润，基因转染MSCs组移植物内可见CTLA4Ig、CD40LIg和胰岛素的表达。结论转移CTLA4Ig和CD40LIg基因修饰MSCs可抑制异种胰岛移植排斥反应，其效果优于MSCs单独应用。